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動物ELISA試劑盒操作步驟如下

  • 更新時間:2022-07-06      瀏覽次數(shù):942
    •    動物ELISA試劑盒是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法。以這些特點在上得到了廣泛的應用,由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。廣泛用于定量檢測各種分子,包括細胞因子,趨化因子,生長因子和蛋白酶等。
        
        動物ELISA試劑盒操作步驟如下:
        一、樣品準備:
        1.取動物全血按常規(guī)方法制備血清,要求血清清亮,無溶血、無污染。樣品1周內可于2~8℃保存,長期需置-20℃保存。
        2.用樣品稀釋液將待檢血清按100倍稀釋(如2μl血清加入198μl樣品稀釋液中,混勻)。陰、陽性對照不用稀釋。
        3.濃縮洗滌液使用前應恢復至室溫使沉淀溶解,然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。
        
        二、檢驗方法:
        1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復至室溫。
        2.取所需用量酶標板條,設空白對照1孔、陰性/陽性對照各2孔,未用的板條盡快密封,2~8℃保存。
        3.空白對照孔加樣品稀釋液100μl;陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100μl;樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。
        4.混勻,置37℃反應30分鐘。
        5.扣去孔內液體,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,重復洗滌5次,拍干。
        6.每孔加酶標記物100μl(空白孔除外)。置37℃反應30分鐘。
        7.洗滌,同步驟5。
        8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混勻,37℃避光反應10分鐘。
        9.每孔加終止液50μl,混勻,用空白孔調零,于450nm(可用630nm作參比波長)測定各孔吸光值(A值)。
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